kk体育2008年38.[生物选修3现代生物科技专题]（15(1)在动物细胞培养过程中，当贴壁细胞分裂生长到细胞表面相互接触时kk体育，细胞会停止分裂增增殖，这种现象称为细胞的接触抑制。此时，瓶壁上形成的细胞层数是单层（或一层）。要使贴壁细胞从瓶壁上分离下来，需要用酶处理，可用的酶是胰蛋白酶。(2)随首细胞传代次数的增多，绝大部分细胞分裂停止，进而出现衰老甚至死亡的现象；但极少数细胞可以连续增殖，其中有些细胞会因遗传物质发生改变而变成不死性细胞，该种细胞的黏着性降低，细胞膜表面蛋白质（糖蛋白）的量减少。(3)现用某种大分子染料，对细胞进行染色时，观察到死细胞被染色，而活细胞不染色，原因是由于活细胞的膜具有选择透过性，大分子染料不能进入活细胞内kk体育，故活细胞不能着色（或由于死细胞的膜丧失了选择透过性，大分子染料能够进入死细胞内而着色）检查某种毒物是否能改变细胞染一的数目，最好选用细胞分裂到中期的细胞用显微镜进行观察。(5)在细胞培养过程中，通常在冷冻（或超低温、液氮）条件下保存细胞kk体育。因为在这种条件下，细胞中酶的活性降低，细胞新陈代谢的速率降低。(6)给患者移植经细胞培养形成的皮肤组织后，发生了排斥现象，这是因为机体把移植的皮肤组织当作抗原进行攻击。2009年41【生物——选修3现代生物科技专题】（15（1）胚胎干细胞是从动物胚胎发育至胎儿的原始性腺细胞中分离得到（2）图中分化程度最低的干细胞是胚胎干细胞。在体外培养条件下，培养液中加入分化诱导因子，可诱导该种干细胞向不同类型的组织细胞分化。（3)在机体内，皮肤干细胞分化成皮肤细胞是机体细胞中基因选择性表达的结果。（4）某患者不能产生正常的白细胞，通过骨髓移植可以达到治疗的目的，骨髓的治疗的实质是将上图的造血干细胞移植到患者体内。（5）若要克隆某种哺乳动物，从理论上分析，上述红细胞、白细胞、神经细胞中不能选用作为供体的细胞是成熟的红细胞，其原因是细胞中无细胞核。（6）若某药物可抑制肝肿瘤细胞NDA的复制，使用该药物可使肝肿瘤细胞停留在细胞周期的间淋巴细胞与骨髓细胞融合，经多次筛选最终得到能分泌特异性抗体的杂交瘤细胞。2010年40．[生物——选修模块3：现代生物科技专题](15分)请回答：（1）植物微型繁殖技术属于植物组织培养的范畴。该技术可以保持品种的遗传特性，繁殖种苗的速度快；。离体的叶肉细胞在适宜的条件下培养，最终能够形成完整的植株，说明该叶肉细胞具有该植物的全部遗传信息（2）把试管苗转接到新的培养基上时，需要在超净工作台上进行，其原因是避免微生物的污染。（3）微型繁殖过程中，适宜浓度的生长素单独使用可诱导试苗生根，而与细胞分裂素配比适宜时可促进芽的增殖。若要抑制试管苗的生长，促使愈伤组织产生和生长，需要使用的生长调节剂是2,4-D(脱落酸、2，4-D)。株鲜重的变化趋势是先增加后下降。据图判断，培养基中不含蔗糖时，试管苗光合作用产生的有机物的量不能(能kk体育、不能)满足自身最佳生长的需要。（5）据图推测，若要在诱导试管苗生根的过程中提高其光合作用能力，应降低(降低，增加)培养基中蔗糖浓度，以便提高试管苗的自养能力。（江苏2008年）32．将动物致病菌的抗原基因导入马铃薯制成植物疫苗，饲喂转基因马铃薯可使动物获得免疫力。以下是与植物疫苗制备过程相关的图和表。请根据以上图表回答下列问题。（1）在采用常规PCR方法扩增目的基因的过程中，使用的DNA聚合酶不同于一般生物体内的DNA聚合酶，其最主要的特点是（2）PCR过程中退火（复性）温度必须根据引物的碱基数量和种类来设定。为根据模板设计的两对引物序列，图2为引物对与模板结合示意图。请判断哪一对引物可采用较高的退火温度？__________。步骤所用的DNA连接酶对所连接的DNA两端碱基序列是否有专一性要求？（5）对符合设计要求的重组质粒T进行酶切，。假设所用的酶均可将识别位点完全切开，请根据图1中标示的酶切位点和表2所列的识别序列，对以下酶切结果作出判断。采用EcoR和Pst酶切，得到_________种DNA片断。采用EcoR和Sma酶切，得到_________种DNA片断。32．（1）耐高温2）引物对B（2010年江苏）27．下表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点，圈l、所示的质粒分子经Sma切割前后，分别含有（2）若对图中质粒进行改造，插入的Sma酶切位点越多，质粒的热稳定性越（3）用图中的质粒和外源DNA构建重组质粒，不能使用Srna切割，原因是相比较，使用BamH和Hind两种限制酶同时处理质粒、外源DNA的优点在于可以防止（7）为了从cDNA文库中分离获取蔗糖转运蛋白基因，将重组质粒导入丧失吸收蔗糖能力的大肠杆菌突变体kk体育，然后在的培养基中培养，以完成目的基因表达的初步检测。（3）Sma会破坏质粒的抗性基因、外源DNA中的目的基因（4）质粒和含目的基因的外源DNA片段自身环化（5）DNA连接（6）鉴别和筛选含有目的基因的细胞（7）蔗糖为唯一含碳营养物质找出规律1.目的基因的两端用不同的酶切割，质粒也用这两种不同的酶切割，可以防止目的基因或质粒的自身环化。2.两种不同的限制酶切出的平末端不同，但链接酶仍可连接，连接后原来使用的两种限制酶都不能再从连接处切开了。另一个原则：不能破坏所有的标记基因

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